Cynhyrchion

Nid yw'n hawdd rhagweld y modd y mae effeithiau treigladau cydamserol yn cyfuno i newid gweithgaredd ensymatig oherwydd nid yw'r effeithiau hyn bob amser yn adiol mewn modd llinol.Felly, gall nodweddu effeithiau treigladau cydamserol o weddillion asid amino sy'n rhwymo'r swbstrad wneud cyfraniad sylweddol at ddealltwriaeth o benodoldeb swbstrad ensymau.Yn y beta-glycosidase o Spodoptera frugiperda (Sfbetagly), mae gweddillion Q39 ac E451 yn rhyngweithio â'r swbstrad ac mae hyn yn hanfodol ar gyfer diffinio penodoldeb y swbstrad.Paratowyd mutants dwbl o Sfbetagly (A451E39, S451E39 a S451N39) gan fwtagenesis wedi'i gyfeirio at y safle, wedi'i fynegi mewn bacteria a'i buro gan ddefnyddio cromatograffaeth affinedd.Nodweddwyd yr ensymau hyn gan ddefnyddio p-nitrophenyl beta-galactoside a p-nitrophenyl beta-fucoside fel swbstradau.Defnyddiwyd y gymhareb k cath/Km ar gyfer mwtaniaid sengl a dwbl o Sfbetagly sy'n cynnwys treigladau safle-gyfeiriedig yn safleoedd Q39 ac E451 i ddangos bod effaith y treigladau dwbl (Gdouble) ar egni rhydd dagr ESdouble (cymhleth cyflwr trawsnewid ensym-) daggerxy) yw swm yr effeithiau sy'n deillio o'r treigladau unigol (Gdouble daggerx a Gdouble daggery).Mae'r gwahaniaeth hwn mewn dagr Gdouble yn dangos bod effeithiau'r treigladau unigol yn gorgyffwrdd yn rhannol.Felly, dim ond unwaith y mae'r effaith gyffredin hon yn cyfrif yn Gdouble daggerxy.Mae data crisialogaidd ar beta-glycosidasau yn datgelu presenoldeb bond hydrogen bidentad sy'n cynnwys gweddillion Q39 ac E451 a'r un grŵp hydrocsyl o'r swbstrad.Felly, mae data thermodynamig a chrisialograffig yn awgrymu bod gweddillion Q39 ac E451 yn dylanwadu ar eu rhyngweithiadau priodol â'r swbstrad.