Cynhyrchion

Mae llwybrau moleciwlaidd pathogenig mewn clefydau cirrhotig yr afu fel firws hepatitis C (HCV), hepatitis awtoimiwn (AIH) a sirosis bustlog sylfaenol (PBC) wedi'u nodweddu'n wael.Mae genynnau a fynegir yn wahaniaethol yn aml yn bwysig mewn pathogenesis afiechyd.Mae hybrideiddio tynnu atal (SSH) yn ddull genom-eang sy'n cyfoethogi ar gyfer trawsgrifiadau mRNA a fynegir yn wahaniaethol.Ein nod oedd gwneud arsylwadau newydd o fynegiant genynnau gwahaniaethol mewn sirosis gan ddefnyddio SSH wedi'i gyfuno ag adwaith cadwyn polymeras meintiol trawsgrifiad amser real (RT-PCR).Archwiliwyd trawsgrifiadau afu mewn sirosis HCV, sirosis AIH, PBC, a meinwe iau nad yw'n glefyd gan SSH.Cafodd clonau DNA cyflenwol canlyniadol (cDNA) eu hailsgrinio ar gyfer mynegiant gwahaniaethol trwy hybrideiddio dot-blotiau ac yna eu dilyniannu.Cafodd mynegiant genynnau dethol ei feintioli gan RT-PCR amser real.Yn dilyn SSH, cafodd 694 o glonau eu hailsgrinio ar gyfer mynegiant genynnau gwahaniaethol, a chafodd 145 ohonynt eu dilyniannu a chanfod eu bod yn deillio o 89 o enynnau gwahanol.Roedd saith clon yn homologaidd yn unig gyda dilyniannau tag dilyniant mynegedig (EST) yn amgodio genynnau heb unrhyw swyddogaeth hysbys.Cadarnhawyd mynegiant uwch-reoledig o bedwar genyn gan RT-PCR amser real: transmembrane 4 aelod o'r teulu super 3 (tetraspanin CO-029) ym mhob math o sirosis, protein rhyngweithio draenogod (HIP) mewn sirosis AIH a chitinase 3-like-1 (HC gp-39 neu ykl-40) ac ailadrodd asid arginine-glutamig (RERE) mewn sirosis HCV.Gwelwyd amryffurfedd genynnau RERE ac amrywiadau sbleis ym mhob meinwe a archwiliwyd.Lleolwyd uwch-reoleiddiad Tetraspanin CO-029 yn bennaf i gelloedd dwythellol bustl.I gloi, gwnaed arsylwadau newydd o fynegiant genynnau gwahaniaethol mewn sirosis dynol gan ddefnyddio SSH fel y prif offeryn darganfod.Yn benodol, mae angen astudiaethau pellach o'r genyn RERE a'i gynhyrchion mewn clefyd yr afu sy'n gysylltiedig â HCV.