Cynhyrchion

Mae croniad niwclear o ffurf mutant o'r protein niwclear Lamin-A, o'r enw Progerin (PG) neu Lamin AΔ50, yn digwydd yn Syndrom Progeria Hutchinson-Gilford (HGPS) neu Progeria, clefyd heneiddio carlam.Un o brif symptomau'r anhwylder genetig hwn yw colli braster isgroenol oherwydd lipodystrophy dramatig. Fe wnaethom ysgogi mynegiant PG dynol a GFP -Green Fluorescent Protein- fel rheolaeth mewn celloedd 3T3L1 gan ddefnyddio system lentiviral i astudio'r effaith mynegiant PG yng nghapasiti gwahaniaethu'r llinell gell hon, un o'r modelau adipogenig a ddefnyddir fwyaf.Gwnaed proteomeg meintiol (iTRAQ) i astudio effaith y croniad PG.Dilyswyd nifer o'r proteinau wedi'u modiwleiddio gan imiwnoblotting a PCR amser real.Dadansoddwyd swyddogaeth mitocondriaidd trwy fesur a) gweithgaredd gwaelodol mitocondriaidd, b) cynhyrchiad anion superoxide ac c) effeithlonrwydd unigol gwahanol gymhlethdodau'r gadwyn resbiradol. Gwelsom fod gor-fynegiant PG gan enyn ral lentivi yn arwain at a gostyngiad yn y gyfradd amlhau a diffygion yn y gallu adipogenaidd o'i gymharu â'r rheolaeth.Dangosodd dadansoddiad proteomeg meintiol fod 181 o broteinau wedi'u modiwleiddio'n sylweddol (p<0.05) mewn preadipocytes sy'n mynegi PG.Mae nam ar swyddogaeth mitocondriaidd mewn celloedd sy'n mynegi PG.Yn benodol, rydym wedi canfod cynnydd yng ngweithgaredd y cymhleth I a gorgynhyrchu anion Superoxide.Mae deori gyda chyfryngau sborion Rhywogaethau Ocsigen Adweithiol (ROS) yn gyrru i ostyngiad mewn proteolysis awtoffagic fel y datgelwyd gan fynegiant cymhareb LC3-II/LC3-I.PG mewn celloedd 3T3L1 yn hyrwyddo newidiadau mewn sawl Proses Biolegol, gan gynnwys strwythur cytoskeleton, metaboledd lipid, calsiwm rheoleiddio, cyfieithu, plygu protein a chynhyrchu ynni gan y mitocondria.Mae ein data yn cryfhau cyfraniad croniad ROS i'r ffenoteip heneiddio cynamserol ac yn sefydlu cysylltiad rhwng camweithrediad mitocondriaidd a cholli proteostasis yn HGPS.