Cynhyrchion

Mae X-gal (sydd hefyd wedi'i dalfyrru BCIG ar gyfer 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) yn gyfansoddyn organig sy'n cynnwys galactos sy'n gysylltiedig ag indole a amnewidiwyd.Cafodd y cyfansoddyn ei syntheseiddio gan Jerome Horwitz a chydweithwyr ym 1964. Mae'r enw cemegol ffurfiol yn aml yn cael ei fyrhau i ymadroddion llai cywir ond hefyd yn llai beichus fel bromochloroindoxyl galactosid.Efallai mai'r X o indoxyl yw ffynhonnell yr X yn y crebachiad X-gal.Defnyddir X-gal yn aml mewn bioleg moleciwlaidd i brofi am bresenoldeb ensym, β-galactosidase, yn lle ei darged arferol, β-galactosidase.Fe'i defnyddir hefyd i ganfod gweithgaredd yr ensym hwn mewn histocemeg a bacterioleg.Mae X-gal yn un o lawer o glycosidau indoxyl ac esterau sy'n cynhyrchu cyfansoddion glas anhydawdd tebyg i liw indigo o ganlyniad i hydrolysis ensymau-catalyzed.

Mae X-gal yn analog o lactos, ac felly gall gael ei hydrolysu gan yr ensym β-galactosidase sy'n hollti'r bond β-glycosidig mewn D-lactos.Mae X-gal, pan gaiff ei hollti gan β-galactosidase, yn cynhyrchu galactos a 5-bromo- 4-chloro-3-hydroxyindole - 1. Mae'r olaf wedyn yn pylu'n ddigymell ac yn cael ei ocsidio i 5,5'-dibromo-4,4'-dichloro -indigo - 2, cynnyrch hynod las sy'n anhydawdd.Mae X-gal ei hun yn ddi-liw, felly gellir defnyddio presenoldeb cynnyrch lliw glas fel prawf ar gyfer presenoldeb β-galactosidase gweithredol.Mae hyn hefyd yn caniatáu i β-galactosidase bacteriol (a elwir yn lacZ ) gael ei ddefnyddio fel gohebydd mewn amrywiol gymwysiadau.

Mewn dadansoddiad dau-hybrid, gellir defnyddio β-galactosidase fel gohebydd i nodi proteinau sy'n rhyngweithio â'i gilydd.Yn y dull hwn, gellir sgrinio llyfrgelloedd genom ar gyfer rhyngweithio protein gan ddefnyddio system burum neu facteriol.Lle mae rhyngweithio llwyddiannus rhwng proteinau sy'n cael eu sgrinio, bydd yn arwain at rwymo parth actifadu i hyrwyddwr.Os yw'r hyrwyddwr wedi'i gysylltu â genyn lacZ, bydd cynhyrchu β-galactosidase, sy'n arwain at ffurfio cytrefi pigmentog glas ym mhresenoldeb X-gal, felly yn dynodi rhyngweithio llwyddiannus rhwng proteinau.Gall y dechneg hon gael ei chyfyngu i sgrinio llyfrgelloedd o faint llai na thua 106. Mae holltiad llwyddiannus X-gal hefyd yn creu arogl budr amlwg oherwydd anweddolrwydd indole.

Gan fod X-gal ei hun yn ddi-liw, gellir defnyddio presenoldeb cynnyrch lliw glas fel prawf ar gyfer presenoldeb β-galactosidase gweithredol.

Mae'r adnabyddiaeth hawdd hon o ensym gweithredol yn caniatáu i'r genyn ar gyfer βgalactosidase (y genyn lacZ) gael ei ddefnyddio fel genyn gohebydd mewn amrywiol gymwysiadau.