Cynhyrchion

Mae difrod ocsideiddiol i fasau DNA yn aml yn arwain at ffurfio purinau ocsidiedig, yn enwedig 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) a 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA), y cyntaf yn ffynnon briw mwtagenig hysbys.Gan fod 8-oxoG yn hawdd i'w ocsidio ymhellach o'i gymharu â basau arferol, ymchwiliwyd in vitro i fewnosod sylfaen yn ystod synthesis DNA gyferbyn â ffurf ocsidiedig o 8-oxoG.Cafodd templed synthetig sy'n cynnwys un briw 8-oxoG ei drin yn gyntaf gyda gwahanol ocsidyddion un-electron neu o dan amodau ocsigen singlet ac yna'n destun estyniad paent preimio wedi'i gataleiddio gan ddarn Klenow exo- (Kf exo-), thymws llo DNA polymerase alffa (pol alffa). ) neu DNA polymeras beta beta (pol beta).Yn gyson ag adroddiadau blaenorol, mae dAMP a dCMP yn cael eu mewnosod yn ddetholus gyferbyn ag 8-oxoG gyda phob un o'r tri pholymeras DNA.Yn ddiddorol, canfuwyd bod ocsidiad 8-oxoG yn achosi mewnosod dAMP a dGMP gyferbyn â'r briw gan Kf exo- gydag ataliad dros dro o estyniad preimiwr o ddigwydd ar safle'r sylfaen addasedig.Ymhellach, mae'r briw yn ffurfio bloc yn ystod synthesis DNA gan pol alffa a pol beta.Mae arbrofion gyda thempled oligonucleotide wedi'i addasu 8-oxoA yn dangos bod 8-oxoA a ffurf ocsidiedig o fewnosodiad uniongyrchol 8-oxoA o dTMP gan Kf exo-.Mae dadansoddiad sbectrometrig màs o oligonucleotidau sy'n cynnwys 8-oxoG cyn ac ar ôl ocsidiad ag IrCl62-yn gyson ag ocsidiad safle 8-oxoG yn bennaf, gan arwain at ffurfio moiety guanidinohydantoin fel y prif gynnyrch.Ni chafwyd tystiolaeth o ffurfio safleoedd sylfaenol.Mae'r canlyniadau hyn yn dangos y gall ffurf ocsidiedig o 8-oxoG, o bosibl guanidinohydantoin, gyfeirio camddarllen a chamosod dNTPs yn ystod synthesis DNA.Pe bai proses o'r fath yn digwydd mewn vivo, byddai'n cynrychioli anaf mwtagenig pwynt sy'n arwain at drawsnewidiadau G-->T a G-->C.Fodd bynnag, mae'r ffurf ocsidiedig cyfatebol o 8-oxoA yn bennaf yn dangos gosod T yn gywir yn ystod synthesis DNA gyda Kf exo-.