Cynhyrchion

Mae LecA (PA-IL) yn lectin sytotocsig ac adhesin a gynhyrchir gan Pseudomonas aeruginosa sy'n clymu galactosidau hydroffobig â phenodoldeb ac affinedd uchel.Trwy ddefnyddio ymasiad cyfieithu lecA-egfp a dadansoddiad imiwnoblot o'r matrics allgellog bioffilm, rydym yn dangos bod lecA yn cael ei fynegi mewn celloedd sy'n cael eu tyfu mewn bioffilm.Mewn profion biofilm statig ar bolystyren a dur di-staen, gostyngwyd dyfnder biofilm a gorchudd arwyneb gan dreiglad lecA a'i wella yn y straen gorgynhyrchu LecA PAO-P47.Roedd sylw arwyneb biofilm gan y straen rhiant, PAO-P47 ond nid y mutant lecA ar gwponau dur hefyd yn cael ei rwystro gan dwf ym mhresenoldeb naill ai isopropyl-beta-D-thiogalactosid (IPTG) neu p-nitrophenyl-alpha-D-galactosid ( NPG).At hynny, gallai bioffilmiau aeddfed o fath gwyllt a ffurfiwyd yn absenoldeb y galactosidau hydroffobig hyn gael eu gwasgaru trwy ychwanegu IPTG.Mewn cyferbyniad, ni chafodd ychwanegu p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) sydd â chysylltiad uchel â'r lecti n P. aeruginosa LecB (PA-IIL) unrhyw effaith ar ffurfio neu wasgaru biofilm.Nid oedd presenoldeb IPTG, NPG na NPF yn effeithio ar dwf planctonig P. aeruginosa PAO1, ac nid oedd y straen ychwaith yn gallu defnyddio'r siwgrau hyn fel ffynonellau carbon, sy'n awgrymu bod yr effeithiau a arsylwyd ar ffurfiant bioffilm o ganlyniad i ataliad cystadleuol LecA-ligand rhwymol.Cafwyd canlyniadau tebyg hefyd ar gyfer bioffilmiau a dyfwyd o dan amodau llif deinamig ar gwponau dur, sy'n awgrymu bod LecA yn cyfrannu at bensaernïaeth biofilm P. aeruginosa o dan amodau amgylcheddol gwahanol.

Mae alffa-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) sy'n gallu rhyddhau'r gweddillion t-fucosyl o'r gadwyn ochr o oligosaccharides syloglucan wedi'i ganfod yn nail planhigion Arabidopsis.Ar ben hynny, purwyd alffa-L-fucosidase gyda phenodoldeb swbstrad tebyg o ddail bresych (Brassica oleracea) i wneud un band ar SDS-PAGE.Cafwyd dau ddilyniant peptid o'r band protein hwn, ac fe'u defnyddiwyd i nodi cod genyn Arabidopsis ar gyfer alffa-fucosidase yr ydym yn bwriadu ei alw'n AtFXG1.Yn ogystal, darganfuwyd genyn Arabidopsis gyda homoleg ag alffa-L-fucosidases hysbys, a chynigiwyd ei enwi fel AtFUC1.Mynegwyd AtFXG1 ac ATFUC1 yn heterologaidd yng nghelloedd Pichia pastoris a'r gweithgareddau alffa-L-fucosidase wedi'u cyfrinachu i'r cyfrwng diwylliant.Roedd yr alffa-L-fucosidase a amgodiwyd gan AtFXG1 yn weithredol yn erbyn yr oligosaccharides o xyloglucan XXFG yn ogystal ag yn erbyn 2'-fucosyl-lactitol ond nid yn erbyn p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.Fodd bynnag, roedd yr AtFUC1 a fynegwyd yn heterologaidd yn weithredol yn erbyn 2'-fucosyl-lactitol yn unig.Felly, rhaid i'r cyntaf fod yn gysylltiedig â metaboledd xyloglucan.