Cynhyrchion

Monogalactopyranosides o fluorescein a fluorescein methyl ester: synthesis, hydrolysis ensymatig gan β-galactosidase biotnylated, a phenderfynu ar gyfernod trylediad trosiadol

Mae monoglycosidau fflworoleuol (d-galactopyranoside (FMG) a d-glucopyranoside) a'u ester methyl (MFMG) wedi'u paratoi o acetobromoglucose / galactos a fflworoleuedd methyl ester mewn cynnyrch da.Mae arbrofion hydrolysis ensymatig (gan ddefnyddio β-galactosidase biotinylated) o'r deilliadau galacto wedi'u perfformio a chyfrifwyd paramedrau cinetig.Gwelwyd cynnydd o 15-20 gwaith yn nwyster y fflworoleuedd yn ystod yr hydrolysis.Mae cynnydd llinellol mewn fflworoleuedd wedi'i nodi ar amser byr a chrynodiad isel o swbstrad, gan wneud y cyfansoddion hyn yn chwilwyr defnyddiol a sensitif ar gyfer galactosidasau.Mae maint y gwerth cyson Michaelis-Menten (Km) ar gyfer MFMG yn uwch nag un FMG sy'n awgrymu newid cydffurfiad posibl i'r swbstrad fflworogenig.Mae gwerth Km ar gyfer β-Gal biotinylated gyda FMG yn is na'r hyn ar gyfer yr ensym brodorol.Mae'r arsylwad hwn yn dangos affinedd swbstrad uwch yr ensym biotinylated o'i gymharu â'r ensym brodorol.Mae cyfernodau trylediad trosiadol wedi'u mesur, ar gyfer swbstradau fflworogenig a'r ddau gynnyrch, gan ddefnyddio sbectrosgopeg cydberthynas fflworoleuedd.Mae cyfernodau trylediad trosiadol ar gyfer swbstradau fflworogenig a'r cynhyrchion hydrolysis ensymatig wedi'u mesur i fod yn debyg, yn yr ystod o 3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1.Felly nid yw gwelliant neu arafwch yn y cineteg ensymatig oherwydd gwahaniaeth mewn symudedd trosiadol swbstrad a chynnyrch mor amlwg â hynny.